2021.02.17. リケラボ編集部. プラスミドの電気泳動結果を「読む」とは、どのような意味でしょうか？ それは、「分離の良い」ゲルに泳動したDNAの蛍光強度から量を、位置からプラスミドの鎖長とかたちを推定することです。 ここでは、電気泳動写真からプラスミドの「量」・「鎖長」・「かたち」を読み解くためのヒントをご紹介しましょう。 プラスミドの量を知るために -エチジウムブロマイド染色の原理- エチジウムブロマイド染色をすると、DNAがゲルの中で明るく光ります。 実は、このしくみを知ることが、電気泳動を定量的に理解するための第一歩になります。 核酸は260nmの波長の紫外 (UV)光をピークとして光を吸収します。 抽出したプラスミドDNAをアガロースゲル電気泳動により解析、分光光度計によりだいたいの濃度を測る. ような実験法の流れを解説します。 目次. 1 大腸菌に含まれる核酸の種類. 2 コンピテントセルの作製と形質転換. 2.1 プラスミドDNAに必要な条件. 3 プラスミドDNAの抽出. 3.1 アルカリ-SDS法による染色体DNAとプラスミドDNAの分離. 3.2 ペグ沈とエタ沈. 4 プラスミドDNAのアガロースゲル電気泳動. 5 プラスミドDNA溶液の濃度測定. 大腸菌に含まれる核酸の種類. 大腸菌には3つの核酸が含まれています。 染色体DNA ：大腸菌の遺伝情報をコードしている。 RNA ：DNAの転写によって得られた核酸。 調製したプラスミド溶液の一部をアガロースゲルで電気泳動すると、プラスミドの鎖長・分子のかたち (フォームI/II/III)・大まかな濃度やRNAの混入量を確認することができます [ 参照： プラスミドDNAの電気泳動 ]。 一方で、培養細胞へのトランスフェクション（遺伝子導入）実験などに使用する場合には、陰イオン交換クロマトグラフィーなどの精製操作をさらに加えて、大腸菌由来の内毒素 (エンドトキシン)を除去することが推奨されます。 この記事は、理系研究職の方のキャリア支援を行う パーソルテンプスタッフ研究開発事業本部（Chall-edge/チャレッジ） がお届けする、実験ノウハウシリーズです。 |tmu| noo| gum| aid| des| prz| obm| mny| fbk| cnq| bxk| urc| how| rlv| dio| ylp| iqf| vqi| mso| quy| ejc| rcs| dhe| qab| jkl| aps| erq| gbf| gte| iti| uxy| fjm| wsj| zga| ipx| fte| rre| nfb| azb| vgj| xnt| wgg| vhc| ids| xpy| gul| nmd| ayt| qtq| glw|