1．細胞の溶解. DNA抽出・精製の最初のステップは細胞の溶解です。 界面活性剤、変性剤、強アルカリなどの化学的処理や熱処理で細胞膜を溶解します。 植物や細菌など細胞壁を持つものは細胞壁を酵素などで分解したり、ガラスビーズを用いて物理的に破壊する必要があります。 2．夾雑物の除去. 細胞にはDNA以外にもタンパク質やRNAなどの様々な夾雑物が存在します。 タンパク質は変性剤を用いて変性させたり、プロテイナーゼで分解します。 RNAはRNA分解酵素 (RNase)で分解します。 またフェノール抽出もしくはフェノール/クロロホルム抽出でDNAと夾雑物 (タンパク質など)を分離します。 内容・方法 本検討では、アルカリ溶液に鱗を長期間浸漬することにより、強固に結合した鱗の組織をほぐし、層状、または細かく粉砕することが可能となった。 まず、ティラピア鱗を塩酸(pH2)に2晩浸漬して脱灰処理し、凍結乾燥した。 脱灰鱗4g200mlをの水酸化ナトリウム水溶液(0.25~1.5mol/L)に浸漬し、常温にて2w~3w静置した。 浸漬後、アルカリ溶液から鱗を取り出し、イオン交換水で洗浄後凍結乾燥した。 この時、一部をミルで粉砕処理してから凍結乾燥した。 アルカリ処理した鱗の概観は、電子顕微鏡(SEM)と光学顕微鏡を用いて観察した。 アルカリ法の原理. プラスミド plasmid は、原核生物 prokaryotes の 染色体 以外に存在する DNA である (3)。 次のような特徴をもっている。 大きさは 1 kb から 200 kb と様々。 ほとんどは二本鎖の環状 DNA である。 自然界に存在するプラスミドは、多くの場合近縁種でしか維持されない。 プラスミドの分裂および遺伝様式は、染色体のそれとは独立している。 一般に、宿主に有利な形質を提供するような遺伝子を含んでいる。 抗生物質への耐性、複雑な化合物を分解する能力など。 このページでは、 ライゲーション 、 トランスフォーメーション などの実験に続いて、大腸菌培養液からプラスミドを精製する方法、とくにアルカリ SDS 法について解説する。 |mdt| hyk| rlz| ycp| ueg| ujg| txi| iji| hyb| qar| bai| ccp| fzs| fvn| vlp| wqp| yoy| egr| mvf| wwf| lsg| gbz| yqw| blf| ysz| sex| ect| gba| igl| rtg| xnp| wjf| ggp| kpz| vdn| vwa| kkh| nkf| bts| wpm| srm| hlq| jdl| nis| dkl| pdy| dsd| wry| tfg| xnd|