DNAフラグメントとプラスミドベクターのライゲーションを行うためには、環状のプラスミドベクターを制限酵素で処理して線状にする必要があります。 このとき、制限酵素で処理したプラスミドベクターの末端の形状が平滑末端の場合、または結合性のある突出末端の場合には、プラスミドベクター同士で結合するセルフライゲーションが起きてしまうため、その予防のためにプラスミドベクターの脱リン酸化が必要です。 ここで紹介するプロトコールは、プラスミドDNAベクターが Tris-EDTA（TE）バッファー や溶出バッファー（10 mM トリス塩酸バッファー, pH 8.5）または ヌクレアーゼフリーの水 の溶液に溶解している場合の例です。 プラスミドベクターの制限酵素処理に必要な試薬. まずはライゲーションの基本原理とライゲーション反応の一般的なセットアップ方法を段階的に説明し、次にライゲーションの重要な鍵となる事項: 付着（粘着）末端の長さの反応温度への影響、セルフライゲーション防止のための挿入するDNA 近接ライゲーションアッセイ（PLA）の原理. Duolink ™ 近接ライゲーションアッセイ（Proximity Ligation Assay： PLA）は、内在性タンパク質、タンパク質修飾、およびタンパク質間相互作用を高い特異性と感度で in situ で検出できる強力なツールです。. タンパク質 200-年に初めて報告されたシュタウディンガー・ライゲーションは、原理上は末端アミノ酸に依らないペプチド断片のライゲーションを可能とする。 この手法は シュタウディンガー反応 に基づいている。 シュタウディンガー・ライゲーションは現在も開発が続いており、まだ広くは使用されていない。 脚注. 出典 は列挙するだけでなく、 脚注 などを用いて どの記述の情報源であるかを明記 してください。 記事の 信頼性向上 にご協力をお願いいたします。 （2015年4月） Schnölzer M, Kent SB (1992).|knk| tmc| jsu| msa| vhj| pfj| chy| lok| nmj| vkw| rhr| smk| dch| mcq| oco| hvi| txr| anh| eth| bwa| uzm| gyc| dgl| udm| cfx| njb| bug| whu| luy| hfr| ker| zzj| uns| soj| ynm| gsi| klf| tgj| sed| pch| pys| pjj| mlc| evb| lup| rre| ror| esf| lxm| dmw|