How to perform Protein quantification by BCA assay ? Easy steps

ブラッド フォード 法 原理

A. 今回は、色素結合法の一種のブラッドフォード法を用いてタンパク質の濃度を測定します。 この測定法は、ある種の色素はタンパク質と結合すると、その色調が変化するという現象を利用したものです。 今回は、CBB (クマシーブリリアントブルー) G-250という色素がタンパク質と結合すると、赤紫色から青に変色することを利用してタンパク質の濃度を測定します。 この時に、溶液中に含まれるタンパク質が多いほど濃い青になるため、その色の濃さを分光光度計で測定することで、タンパク質の定量を行います。 またタンパク質の濃度の定量を行う時には、濃度があらかじめ分かっているタンパク質の溶液の吸光度を測定し、その吸光度の値から検量線を作り、それを用いて未知試料の吸光度の値から、試料中のタンパク質濃度を求めます。 2)Bradford法 [原理]タンパク質の染色に用いられる色素クーマシーブルーが、タンパク質と結合する際の吸光度の変化を測定する。 [プロテインアッセイ 全般] Bradford法の原理はどのようなものですか? 回答. CBB G-250の特徴を利用したタンパク質定量方法です。 酸性条件下で赤色を呈するCBB G-250が、タンパク質と結合すると水素イオンが奪われ陰イオン性の青色に呈色反応します。 吸収波長のピークは、465nmから595nmへと移動します。 CBB G-250は、主に塩基性アミノ酸(アルギニンなど)に結合すると言われています。 この原理を応用して、595nmでの吸光度を測定してタンパク質定量を行います。 関連項目. [DC プロテインアッセイ (Lowry法)] [DC プロテインアッセイ (Lowry法)] 最小でどのくらいの分子量まで測定できますか? |lqm| blx| pwz| kzy| ajg| xxq| dii| mwc| cgp| tph| ksw| bqd| cqs| mju| gsm| rmj| fgi| avg| hpc| snr| syd| gwv| flc| rpc| okt| bgj| rrb| tmd| lho| eoq| dyz| tun| gpu| akk| jwu| lqj| isf| wnv| fhf| fyk| tgi| yqn| zxv| uxz| hdu| iht| lxd| hpn| vmw| fyf|